去甲肾上腺素对大鼠肝星状细胞作用的实验研究

摘要

目的探讨交感神经系统在肝纤维化发生和发展中的作用。方法采用免疫荧光和RT-PCR检测体外培养的肝星状细胞（HSC）中α1、α2-肾上腺素能受体的表达,用四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度的去甲肾上腺素（NE）对HSC增殖活性的影响。同时用RT-PCR检测受NE作用后HSC的活化指标胶原蛋白-1、转化生长因子β（TGFβ）及α-平滑肌动蛋白（α-SMA）的表达。用高效液相色潜-电化学法测定活化的HSC中交感神经递质NE的水平。结果α1和β2-肾上腺素能受体表达于HSC的胞膜和胞质内;NE可呈剂量依赖性地促进HSC增殖,在浓度为100μmol/L时达到最大效立。F=140.464,P＜0.05,差异有统计学意义。以NE 100μmol/L作用细胞24 h后,可显著促进反应HSC活化的指标上升,胶原蛋白-1表达为0.3022±0.0610、TGFβ表达为2.2080±0.2151、α～SMA mRNA表达为0.5469±0.0108,与对照组胶原蛋白-1（0.1040±0.0556）、TGFβ（1.1190±0.0070）、α-SMA mRNA表达（0.0759±0.0449）比较,t值分别为-4.160、-8.763和-17.651,P值均＜0.05,差异均有统计学意义。HSC可以合成并释放NE,且受血小板衍生生长因子（10 ng/ml）刺激后HSC中NE含量为（14.24±0.21）ng/ml,对照组为（11.34±0.15）ng/ml,两组比较,t=-32.907,P＜0.05,差异有统计学意义。结论抑制交感神经系统使HSC活性降低对临床上治疗肝纤维化有一定的指导意义。