痉挛性截瘫蛋白21对乙型肝炎病毒复制的影响及其机制

摘要

目的探讨人痉挛性截瘫蛋白21（SPG21）对乙型肝炎病毒（HBV）复制的影响,并探讨其调节机制。方法将HBV感染性克隆pHBV1.3及其启动子pHBV-Luc分别转染HepG2细胞,加入不同浓度的SPG21蛋白,采用酶联免疫吸附法检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg含量;RTPCR和Western blot法检测HepG2细胞内HBV核心蛋白mRNA和蛋白表达;荧光定量PCR法检测细胞闭合环状DNA（cccDNA）的水平;采用Luminometer荧光检测仪分析HBV启动子活性的变化。实验数据用均数±标准差（x±s）表示,组间比较采用t检验。结果 SPG21能够上调细胞上清液中HBsAg和HBeAg的含量,同时能够促进细胞内HBV核心蛋白的表达和HBV cccDNA的产生,并上调HBV启动子活性,其调节作用呈剂量依赖效应;与对照组比较,加入50μg/ml,100μg/ml,200μg/ml SPG21蛋白48h后,HBV启动子上调倍数分别为1.63、3.09和4.66（P＜0.05）。结论 SPG21能够促进HBV在HepG2细胞中的复制。