肝细胞癌潜在血清标志物GRO-1和Thrombin的蛋白鉴定及其临床特征分析

摘要

目的寻找有效的早期诊断及判断肝细胞癌（HCC）预后的血清标志物。方法利用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术确定HCC患者血清蛋白表达谱。对HCC 81例、肝炎82例和健康志愿者80例血清标本蛋白表达谱进行比较,经高效液相色谱分离和质谱鉴定蛋白质序列。另取48例HCC、54例肝硬化、62例大肠癌、55例鼻咽癌、36例肺癌和42例健康志愿者血清,利用PS20免疫芯片和SELDI技术对候选标志物进行验证。荧光定量PCR技术检测55例HCC患者癌和癌旁组织,13例正常肝组织中候选标志物基因的表达情况,探讨它们与HCC患者临床预后的相关性。结果检出两个HCC候选标志物凝血酶轻链（Thrombin light chain）和生长相关性癌基因编码蛋白（GRO-1）。以这两个因子建立的HCC诊断模型敏感性和特异性均为89.6%,显著高于甲胎蛋白（AFP）单独检测敏感性和特异性（69%,83%）。它们与AFP联合使用后的灵敏度和特异度更高（91.7%,92.7%）,而对大肠癌、鼻咽癌、肺癌的敏感性均不超过50%。HCC患者癌组织的GRO-1与Thrombin的表达具有显著相关性（r=0.73,P＜0.01）,GRO-1表达与肝外转移及术后复发显著相关（P＜0.05）,Thrombin的表达量与术后复发及AFP升高相关（P＜0.05）。GRO-1和Thrombin高表达的患者术后5年生存率明显低于GRO-1低表达的患者。GRO-1表达量是影响HCC预后的独立影响因素。结论 Thrombin light chain和GRO-1是HCC的潜在血清标志物,并有希望成为HCC患者术后复发转移的预测指标。