慢性B淋巴细胞白血病患者免疫球蛋白Fab段基因克隆及其可变区序列分析

摘要

目的分析慢性B淋巴细胞白血病患者外周血单个核细胞免疫球蛋白Fab段基因.方法提取慢性B淋巴细胞白血病患者外周血单个核细胞RNA,选用与Ig FR1 5′和CH1Cμ 3′或CL区(Cκ/Cλ)3′互补的多对引物,通过RT-PCR扩增Ig Fab段基因,进行克隆和序列测定,并通过DNAtools和计算机网络对其可变区基因同源性进行分析和基因家族归类.结果 7例患者中4例外周血单个核细胞扩增出轻链基因,3例扩增出重链基因.所扩增的4条轻链基因均属于κ轻链,3条重链均为μ链基因.利用DNAtools分析软件,对轻链和重链分别进行同源性比较,3条重链可变区基因差异较大,轻链可变区基因具有一定的同源性.对所扩增的Ig基因进行归类,结果4例患者的轻链均属于Vκ I 亚组;3例患者的重链中2例属VH3 家族,1例为VH5家族.结论慢性B淋巴细胞白血病患者存在独特的决定簇和相似决定簇.