慢病毒载体介导单纯疱疹病毒胸苷激酶/更昔洛韦系统抑制移植物抗宿主病的实验研究

摘要

目的研究慢病毒载体介导单纯疱疹病毒胸苷激酶/更昔洛韦（HSV-TK/GCV）系统对小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT）后移植物抗宿主病（GVHD）的防治作用。方法将转染HSV-TK基因的慢病毒感染供鼠（C57BL/6小鼠）脾脏淋巴细胞,将感染后的淋巴细胞与供鼠骨髓细胞混合,移植给经60Coγ射线照射后的受鼠（BALB/c小鼠）。分别于移植后当天、移植后7天（+7天）和+12天腹腔注射GCV25mg/kg×7d,观察受鼠生存期、GVHD发生率及严重程度、T细胞亚群（CD3、CD4、CD8）及异基因嵌合等指标。结果HSV-TK/GCV使用0天、+7天、+12天组受鼠生存时间分别为（30.10±5.21）d、（36.40±5.28）d、（28.20±4.82）d,三组生存时间均较移植埘照组[（15.10±0.43）d]明显延长（P＜0.05）;HSV-TK/GCV+7天组小鼠50d存活率达60%,高于HSV-TK/GCV0天（40%）和+12天组（30%）（P＞0.05）。对照组小鼠全部发生Ⅲ～Ⅳ级GVHD,实验组死亡小鼠有Ⅱ～Ⅲ级GVHD病理学改变,而长期生存小鼠仅出现Ⅰ～Ⅱ级GVHD。在+5,+10,+15d,3个时间点实验组小鼠CD4+细胞明显高于对照组（P＜0.05）,CD8+细胞均低于对照组（P＜0.05）。+30天受鼠异基因嵌合率为100%。结论慢病毒载体介导的HSV-TK/GCV系统能有效控制小鼠allo-BMT后GVHD;+7天外周血白细胞数开始回升时用GCV控制GVHD效果最佳。