实时定量PCR方法检测急性早幼粒细胞白血病患者PML-RARα融合基因的评价

摘要

目的应用"欧洲抗癌计划"所定的实时定量 PCR（RQ-PCR）法检测急性早幼粒细胞白血病（APL）患者 PML-RARα不同转录本异构体并对结果进行分析。方法应用 RQ-PCR 法对30例不同类型（长型、短型和变异型）PML-RARα阳性 APL 患者的骨髓标本进行扩增,并对扩增结果进行凝胶电泳。结果短型 RQ-PCR 体系能扩增出长型、变异型和短型 PML-RARα转录本,变异型反应体系能扩增出长型和变异型 PML-RARα转录本,长型反应体系仅能扩增出长型 PML-RARα转录本;电泳及测序结果显示筑巢式 PCR 检测为长型 PML-RARα的患者标本经短型 RQ-PCR 体系扩增后可见3条带（621、477和218 bp）,筑巢式 PCR 检测为变异型 PML-RARα的患者标本经短型 RQ-PCR 体系扩增后也可见3条带（567、423和218 bp）。结论 RQ-PCR 方法敏感、可靠,可用于 APL 患者微量残留病的随访监测,但用于前瞻性分子诊断时要对结果认真分析。