三氧化二砷对伊马替尼耐药bcr-abl基因突变细胞株生长抑制作用的研究

摘要

目的探讨三氧化二砷（As2O3）在体外对伊马替尼（IM）耐药bcr-abl基因突变细胞株（简称IM耐药细胞株）的生长抑制作用。方法采用MTT比色法观察IM敏感细胞株32Dp210和包括32Dp210等15种IM耐药细胞株的细胞增殖能力。选择其中5种慢性粒细胞白血病（CML）常见基因突变型细胞株,经膜联蛋白V（Annexin V）标记流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测bcr-abl融合蛋白、CRKL磷酸化及细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果32Dp210等15种IM耐药细胞株具有不同程度的IM耐药性（IC50为IM敏感细胞株32Dp210的1.5～25.0倍）。As2O3对IM耐药细胞株的IC50值仅为32Dp210细胞的0.18～0.34。将5种CML常见的IM耐药细胞株与32Dp210比较发现,As2O3更显著地呈剂量依赖性抑制IM耐药细胞株bcr-abl融合蛋白、磷酸化CRKL蛋白的表达,诱导细胞凋亡的作用也明显强于32Dp210。4 pmol/L As2O3可激活5种突变细胞的caspase-3、8、9蛋白表达。结论As20,在体外对IM耐药细胞株具有比IM敏感细胞株更显著的生长抑制和诱导凋亡的作用,细胞凋亡的产生主要与caspase-3、8、9蛋白的激活有关,提示As2O3,可能成为治疗IM耐药CML患者的新选择。