IL-6/JAK/STAT3介导苦参碱对K562细胞的增殖抑制作用

摘要

目的探讨JAK/STAT3介导的信号途径在苦参碱对K562细胞增殖抑制作用中的分子机制。方法以不同浓度苦参碱处理K562细胞,Western blot法分析JAK/STAT3通路分子JAK2、STAT3及其磷酸化蛋白表达的改变;荧光实时定量RT-PCR及Western blot法分析STAT3下游调控基因Bcl-xL、Cyclin D1、c-Myc的表达;荧光实时定量RT-PCR及ELISA法检测K562细胞IL-6表达的改变。以IL-6预处理K562细胞,Westernblot法分析苦参碱对细胞内JAK2、STAT3及其磷酸化蛋白表达的作用。结果0.5 mg/ml苦参碱处理48 h,K562细胞内STAT3及JAK2总蛋白表达无明显变化,磷酸化STAT3（p-Tyr705 STAT3、P-Ser727 STAT3）和磷酸化JAK2（p-JAK2）表达水平分别由处理前的0.690±0.119、1.150±0.263和0.670±0.137下降至0.370±0.024、0.700±0.172和0.049±0.057。苦参碱对STAT3下游调控基因Bcl-xL、CyclmD1及c-Myc的转录及蛋白表达均有抑制作用,并可显著抑制IL-6的表达和分泌,0.5和0.8 mg/ml苦参碱处理后细胞培养上清中IL-6浓度分别为（10.74±1.83）pg/ml和（8.66±1.24）pg/ml,较处理前[（35.1±1.93）pg/ml]显著降低（P＜0.05）。IL-6预处理K562细胞后,STAT3、JAK2、P-STAT3及P-JAK2表达均有增加,苦参碱可抑制IL-6对上述分子表达的上调。结论苦参碱抑制K562细胞增殖与JAK/STAT3介导的信号通路抑制有关,IL-6表达抑制可能是苦参碱调控JAK/STAT3通路活性的始动机制。