PD-1抑制剂Nivolumab对CD19嵌合抗原受体T细胞体外增殖和杀伤活性的影响

摘要

目的评估程序性细胞死亡受体1（PD-1）抑制剂Nivolumab对CD19-CAR-T细胞体外增殖和杀伤活性的影响。方法收集5例外周血PD-1高表达恶性淋巴瘤患者的外周血T细胞制备CD 19-CAR-T细胞,在培养第8天加入终浓度分别为72、36、18μg/ml的Nivolumab,同时设患者T细胞联合72μg/ml Nivolumab及正常人CD19-CAR-T细胞为对照,采用CCK-8法、LDH细胞毒性检测、ELISA法比较各组的增殖活性、杀伤活性及炎症因子水平。结果①PD-1高表达患者CD19-CAR-T细胞转染率与正常人接近[（32.80±7.22）%对（35.10±5.84）%,t=-0.554,P=0.593]。②72μg/ml Nivolumab联合CD19-CAR-T细胞不影响其增殖,但联合应用24、48 h对Pfeiffer细胞的杀伤率均优于单用患者CD19-CAR-T细胞及患者来源T细胞+72μg/ml的Nivolumab（P值均＜0.001）,其中48 h时各组的杀伤率分别为（71.61±9.50）%、（6.77±1.26）%、（15.33±4.11）%。72、36μg/ml Nivolumab联合来源CD19-CAR-T细胞对Pfeiffer细胞的杀伤率差异无统计学意义（P值分别为0.281、0.267）,二者均高于患者来源CD19-CAR-T细胞+18μg/ml Nivolumab组（P值均＜0.001）。③不同剂量Nivolumab联合患者来源CD19-CAR-T细胞,不影响炎症因子IFN-γ、TNF-α水平（P值均＞0.05）。结论终浓度为36μg/ml的Nivolumab与CD19-CAR-T细胞联合应用,可在减轻药物毒副作用同时增强CD19-CAR-T细胞的杀伤活性。