miR-193a调控WT1影响高糖诱导的小鼠足细胞凋亡

摘要

目的探讨miR-193a对高糖诱导的小鼠肾足细胞凋亡的影响及作用机制。方法实验中将足细胞分为6组:正常糖组、高糖组、miR-193a inhibitor组、miR-NC inhibitor组、miR-193a mimic组和miR-NC mimic组。使用流式细胞术检测足细胞凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-193a和肾母细胞瘤(WT)1 mRNA表达;Western印迹检测足细胞WT1、酶切半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达;靶基因预测网站TargetScan预测WT1可能是miR-193a的靶基因,使用双荧光素酶实验验证二者的靶向关系。结果高糖诱导的小鼠肾足细胞中细胞凋亡率显著升高,miR-193a高表达,细胞中酶切caspase-3和Bax蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白水平显著下降(P<0.05),而miR-193a inhibitor逆转了这一过程,miR-193a mimic加重了这一过程。高糖培养的小鼠足细胞WT1 mRNA和蛋白表达水平显著降低,miR-193a inhibitor转染后WT1 mRNA和蛋白水平显著升高、miR-193a mimic转染后WT1 mRNA和蛋白水平降低(P<0.05)。上调WT1可降低miR-193a对高糖诱导的小鼠足细胞凋亡(P<0.05)。结论miR-193a靶向抑制WT1的表达,减少高糖诱导的小鼠足细胞凋亡。