LINC00339在急性心肌梗死大鼠中表达及其对心肌细胞凋亡、炎症反应和Rock1、NLRP3表达的影响

摘要

目的探讨LINC00339在急性心肌梗死(AMI)大鼠中的表达及其作用机制。方法将SD大鼠分为对照组(不做处理)、假手术组(仅开胸不结扎冠状动脉)、模型组、阴性对照(NC)组和siLINC00339组,后3组采用冠状动脉左前降支结扎法构建AMI模型,将携带NC及siRNA-LINC00339的慢病毒于术后注射至NC组和siLINC00339组大鼠心肌内;术后72 h采用心脏彩超检测心功能指标左室长轴缩短分数、左室射血分数、左室舒张末期内径和左室收缩末期内径变化,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测心肌梗死面积,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测心肌凋亡指数,比色法检测心肌组织中半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β含量,实时荧光定量PCR(RT-qRCR)法检测心肌组织中LINC00339、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(Rock)1、含NLR家族Pyrin域蛋白(NLRP)3 mRNA表达,Western印迹检测心肌组织中Bcl-2、Bax、Rock1、NLRP3蛋白表达。结果与对照组比较,假手术组心肌组织中LINC00339表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组比较,模型组左室长轴缩短分数、左室射血分数和心肌组织中Bcl-2 mRNA与蛋白表达水平均明显降低,而左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、心肌梗死面积、凋亡指数和心肌组织中Caspase-3活性、TNF-α、IL-6、IL-1β含量及LINC00339、Bax、Rock1、NLRP3 mRNA和Bax、Rock1、NLRP3蛋白表达水平均明显升高(P0.05);与NC组比较,siLINC00339组上述各指标变化趋势与模型组相反(P<0.05)。结论LINC00339在AMI大鼠心肌组织中表达上调,下调其表达可抑制心肌细胞凋亡和炎症反应,其作用机制可能与抑制Rock1、NLRP3表达有关。