miR-374-5p调控Bax影响缺氧诱导心肌细胞凋亡的分子机制

摘要

目的 探讨miR-374-5p靶向B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)对缺氧诱导心肌细胞凋亡的分子机制.方法 检测常氧和缺氧条件下大鼠心肌细胞H9c2和CP-R073中miR-374-5p的表达.以H9C2细胞缺氧处理建立细胞模型,随机分为H9c2常氧培养组、H9c2缺氧培养组、缺氧+miR-374-5p组、缺氧+miR-NC组、缺氧+miR-374-5p+pcDNA3.1-Bax组和缺氧+miR-374-5p+pcDNA3.1组.qRT-PCR检测各组H9c2中miR-374-5p的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测Bax、Bcl-2、细胞周期蛋白(Cyclin)D1和p21蛋白的表达.双荧光素酶报告基因分析法验证miR-610对ORC1的靶向作用.结果 在缺氧条件下,大鼠心肌细胞H9c2和CP-R073中miR-374-5p的表达显著下降(P<0.05).过表达miR-374-5p可抑制缺氧诱导的H9c2细胞凋亡(P<0.05).Bax是miR-374-5p的靶基因,miR-374-5p负向调控Bax的表达.过表达Bax可逆转miR-374-5p对缺氧诱导的H9c2细胞凋亡的抑制作用.结论 miR-374-5p可通过靶向下调Bax抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡.