LncRNA LINC00277通过与miR-27 b结合调控p53表达抑制宫颈癌细胞的侵袭和迁移

摘要

目的 探讨长链非编码RNA LINC00277(LncRNA LINC00277)对宫颈癌细胞迁移及侵袭的影响及其作用机制.方法 qRT-PCR检测宫颈癌组织、癌旁组织、宫颈癌细胞及正常宫颈细胞中LINC00277、miR-27b、p53 mRNA表达水平,Western印迹检测p53蛋白表达.以宫颈癌Hela细胞为研究对象,实验分组pcDNA-LINC00277组、pcDNA-NC组、mimic-miR-27b组、mimic-NC组、inhibitor-miR-27b组、miR-NC组、pcDNA-LINC00277+mimic-miR-27b组、pcDNA-LINC00277+miR-NC组.MTT、Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移及侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡率.双荧光素酶报告基因实验验证LINC00277的靶基因miR-27b,miR-27b的靶基因p53.结果 LINC00277在宫颈癌组织中的表达水平低于癌旁组织(P<0.05),宫颈癌Hela、SiHa细胞中LINC00277的表达水平低于E6E7细胞(P<0.05),miR-27b的表达水平高于正常宫颈细胞E6E7(P<0.05);pcDNA-LINC00277组宫颈癌Hela细胞增殖活性低于pcDNA-NC组(P<0.05),细胞凋亡率高于pcDNA-NC组(P<0.05),迁移及侵袭细胞数少于pcDNA-NC组(P<0.05);LINC00277可竞争性结合miR-27b而降低其表达,miR-27b可靶向结合p53而抑制其表达;pcDNA-LINC00277+mimic-miR-27b组宫颈癌Hela细胞中P53的表达水平低于pcDNA-LINC00277+miR-NC组(P<0.05),细胞增殖活性高于pcDNA-LINC00277+miR-NC组(P<0.05),迁移及侵袭细胞数多于pcDNA-LINC00277+miR-NC组(P<0.05).结论 LINC00277过表达通过靶向调控miR-27b/p53的表达进而抑制宫颈癌细胞迁移及侵袭.