miR-221在急性心肌梗死大鼠心肌损伤中的作用及机制

摘要

目的 探讨miR-221在急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌损伤中的作用及相关机制.方法 通过冠状动脉左前降支结扎大鼠建立AMI模型,将构建成功的36只AMI大鼠模型随机分为AMI组、对照组及抑制组,另外设立假手术组采用冠状动脉左前降支穿线不结扎,每组各12只.抑制组和对照组分别采用心肌组织局部注射慢病毒转染的miR-221抑制剂及miR-221 NC,AMI组和假手术组每天给予等量生理盐水,隔日1次,连续2 w.实时定量-聚合酶链反应(PCR)检测miR-221表达,记录大鼠心脏功能,并采用原位末端凋亡法(Tunel)检测心肌凋亡指数(AI),紫外分光光度法检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3及Caspase-9活性,Western印迹检测Bcl-2、Bax,增殖细胞核抗原(PCNA),Ki67蛋白表达及细胞外蛋白调节激酶(ERK1/2)磷酸化水平.结果 与假手术组miR-211表达量相比,AMI组显著提高(P<0.01).与假手术组miR-211表达量相比,AMI组及对照组均显著提高(P<0.01);与AMI组及对照组相比,抑制组显著降低(P<0.01).与假手术组和抑制组比较AMI组及对照组左室射血分数(LVEF)、左室长轴缩短分数(FS)水平均显著降低,而左室舒张末期内径(LVEDD)及左室收缩末期内径(LVESD)水平均显著升高(P<0.01).与假手术组心肌AI相比,AMI组及对照组均显著提高(P<0.01);与AMI组及对照组相比,抑制组显著降低(P<0.01).与假手术组相比,AMI组及对照组中心肌组织中Caspase-3及Caspase-9活性明显升高(P<0.01);与AMI组及对照组相比,抑制组中心肌组织中Caspase-3及Caspase-9活性显著降低(P<0.01).与假手术组比较,AMI组及对照组中Bcl-2、PCNA及Ki67表达量明显下调(P<0.01),Bax表达量明显上调(P<0.01);与AMI组及对照组比较,抑制组中Bcl-2、PCNA及Ki67表达量明显上调(P<0.01),Bax表达量明显下调(P<0.01).与假手术组p-ERK1/2表达量比较,AMI组及对照组明显下调(P<0.01);与AMI组及对照组比较,抑制组明显上调(P<0.01).结论 miR-221低表达能显著AMI大鼠心肌损伤,与上调EKR1/2磷酸化水平相关.