miR-92a在大鼠缺血再灌注心肌组织中的表达及对心肌细胞凋亡的影响

摘要

目的 研究miR-92a在大鼠缺血再灌注(I/R)心肌组织中的表达及对心肌细胞凋亡的影响.方法 将雄性SD大鼠随机分为I/R组和假手术组,采用夹闭冠状动脉法将I/R组大鼠制备成心肌缺血再灌注模型,采用新生SD乳鼠制备原代心肌细胞并制备缺氧/复氧(H/R)细胞模型,以Lipofectimane2000脂质体干扰心肌细胞中miR-92a的表达,以定量PCR检测miR-92a在心肌组织中的表达,流式细胞仪检测miR-92a对心肌细胞凋亡的影响,Western印迹检测凋亡相关蛋白淋巴瘤/白血病(Bcl)-2和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(酶切Caspase)-3的表达.结果 miR-92a在I/R心肌组织中的表达与假手术组相比显著升高(P<0.05),在H/R组心肌细胞中的表达也显著高于常氧组细胞(P<0.05).与对照组(未进行转染)相比,miR-92a NC组(转染miR-92a阴性对照)细胞中miR-92a的相对表达差异无统计学意义(P>0.05),而miR-92a inhibitor组(转染miR-92a抑制剂)细胞中miR-92a的相对表达量显著升高(P<0.05).与对照组相比,I/R组细胞凋亡率显著升高(P<0.05);I/R+miR-92a inhibitor组细胞凋亡率较I/R组显著降低(P<0.05).与对照组相比,I/R组细胞中Bcl-2蛋白的相对表达量显著降低(P<0.05),酶切Caspase-3蛋白的相对表达量显著升高(P<0.05);与H/R组相比,I/R+miR-92a inhibitor组细胞中Bcl-2蛋白的相对表达量显著升高(P<0.05),酶切Caspase-3蛋白的相对表达量显著降低(P<0.05).结论 miR-92a在缺血再灌注后心肌组织和细胞中呈现高表达,下调miR-92a表达后能够减弱缺血再灌注引起的细胞凋亡,其作用机制可能与调控Bcl-2和酶切Caspase-3蛋白的表达有关.