单细胞凝胶电泳技术分析过氧化氢对大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用

摘要

目的观察不同浓度过氧化氢(25～200 μmol/L)分别作用于正常大鼠外周血淋巴细胞不同时间(5 min和20 min)后细胞DNA的损伤情况.方法利用快速、灵敏的检测细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳(SCG)技术结合激光扫描共聚焦显微镜,以"彗星样"淋巴细胞出现率(计数一定量细胞其中彗星样细胞所占的比例)、总彗星长度("彗星"电泳方向上的最大长度,即尾长)和尾距(尾部DNA占总DNA的百分比与头尾部中心间距的乘积)来评价淋巴细胞DNA的损伤程度.结果过氧化氢能剂量依赖性地导致大鼠外周血淋巴细胞DNA的明显断裂损伤,能使"彗星样"淋巴细胞出现率、总彗星长度和尾距显著增加,并随着时间的延长损伤加重.结论提示活性氧或自由基增多可能是造成体内细胞DNA断裂损伤的重要原因.