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长寿老人永生细胞库的建立与保存

             

摘要

目的建立长寿老人永生细胞库,为长寿遗传机制的研究提供永久的研究材料.方法用EB病毒(Epstein-Barr virus)转染长寿老人外周血B淋巴细胞,采用20%FBS RPMI 1640培养液,配合环胞霉素A和PHA,置37 ℃ 5% CO2 培养箱内培养.及时加液或少量换液,当细胞增长到一定数量时分瓶传代,分瓶传代到16瓶及以上予以冻存,之后复苏以证明冻存成功情况.结果成功地对广西巴马长寿乡壮族长寿家庭的24个个体建立了永生细胞株.其中,百岁老人6株,90~99岁老人12株,长寿老人≤66岁的直系亲属6株.结论所有建成的细胞株冻存后复苏的成功率为100%.经染色体G显带分析未见异常,表明建立细胞株的方法稳定.

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