特异性10-23脱氧核酶对肝癌相关基因IGF-ⅡmRNA的体外切割作用

摘要

目的 体外观察10-23脱氧核酶(DRz)对肝癌相关基因-胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ) mRNA的切割活性.方法 用RT-PCR方法扩增出IGF-Ⅱ基因的cDNA 片段,然后定向克隆到质粒PGEM-3Z T7 启动子的下游,获得重组质粒PGEM-3Z-IGF-Ⅱ,用限制性核酸内切酶HindⅢ将重组质粒线性化后,在体外转录出IGF-Ⅱ基因的mRNA片段,作为DRz切割的底物.结果 在无细胞系只观察到DRz1具有切割靶mRNA的作用,DRz2,DRz3和ASODN均未显示出切割活性.结论 筛选出的活性DRz1可进一步的用于细胞内实验.