急性早幼粒细胞白血病融合基因荧光定量动态检测的临床意义

摘要

目的 利用逆转录荧光实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARα融合基因的方法,并观察其敏感度.方法 建立荧光染料SYBR-Green1 RQ-PCR技术,同时检测56例APL融合基因PML-RARα的表达水平,并且与传统巢式PCR方法进行敏感度比较.结果 RQ-PCR的灵敏度均可达到50拷贝,稍低于巢式PCR,但RQ-PCR定量准确,不易污染.分别取103和107拷贝的PML-RARα质粒以及患者cDNA同时作8次平行扩增,批内变异系数分别为7.31%、8.26%和5.02%,表明方法稳定.不同APL患者PML-RARα表达水平有较大差异,初诊患者PML-RARα/GAPDH 比值介于0.018～0.799,中位值为0.070.结论 RQ-PCR可以准确检测微小残留病(MRD)融合基因表达水平;监测融合基因表达可以有效观察治疗效果.