马齿苋总黄酮调控LncRNA TTTY15减轻MPP^(+)诱导的SK-N-SH细胞损伤

摘要

目的 探讨马齿苋总黄酮对1-甲基-4-苯基碘化吡啶(MPP^(+))诱导的人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH损伤的影响及其作用机制。方法 采用MPP^(+)诱导SK-N-SH细胞建立帕金森病体外细胞模型,不同浓度马齿苋总黄酮处理细胞,用脂质体法分别将si-NC、si-TTTY15转染至SK-N-SH细胞,转染成功后用MPP^(+)处理细胞,将pcDNA-TTTY15转染至SK-N-SH细胞,转染成功后用马齿苋总黄酮与MPP^(+)共同处理细胞;噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;利用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)水平;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TTTY15、miR-7-5p表达量;双荧光素酶报告实验验证TTTY15和miR-7-5p的靶向结合关系;Western印迹检测酶切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved-caspase)3蛋白表达量。结果 马齿苋总黄酮以浓度依赖性的方式明显降低MPP^(+)诱导的SK-N-SH细胞增殖抑制率和TTTY15表达量,明显降低凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白水平、LDH活性和MDA水平(均P<0.05),而miR-7-5p表达量和SOD活性明显升高(P<0.05);转染si-TTTY15可明显降低MPP^(+)诱导的SK-N-SH细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白水平、LDH活性和MDA水平(P<0.05),而SOD活性明显升高(P<0.05);TTTY15可靶向结合miR-7-5p;TTTY15过表达可通过抑制miR-7-5p的表达而逆转马齿苋总黄酮对MPP^(+)诱导的SK-N-SH细胞增殖、凋亡及氧化应激的作用。结论 马齿苋总黄酮可通过调节TTTY15/miR-7-5p的表达而促进MPP^(+)诱导的SK-N-SH细胞增殖及抑制细胞氧化应激、凋亡从而减轻帕金森病模型细胞损伤。