二氢杨梅素通过Janus激酶3/信号转导与转录激活子5信号通路抑制氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞M1型极化

摘要

目的观察二氢杨梅素（DMY）对氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL）诱导的巨噬细胞M1型极化的影响, 并探讨其机制。方法用含Ox-LDL（50 mg/L）和DMY（40 μmol/L）的RPMI1640培养基孵育细胞24 h, 观察Janus激酶3/信号转导与转录激活子5（JAK/STAT5）信号通路抑制剂AG-490对DMY作用的影响。酶联免疫法检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）、转化生长因子-β（TGF-β）和白细胞介素-10（IL-10）的水平, Western blot检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和精氨酸酶1（Arg1）的表达。结果与对照组比较, Ox-LDL组巨噬细胞中iNOS蛋白的表达和培养液上清中TNF-α和IFN-γ的水平显著增加（t=4.12、2.89、3.44, P=0.023、0.036、0.031）, 而细胞中Arg1蛋白的表达水平和培养液上清中TGF-β和IL-10的水平显著降低（t=3.71、2.31、2.67, P=0.034、0.038、0.034）, 细胞中p-JAK3/JAK3和p-STAT5/STAT5的比值显著增加（t=3.93、2.65, P=0.007、0.021）。与Ox-LDL组比较, Ox-LDL+DMY组巨噬细胞中iNOS蛋白的表达和培养液上清中TNF-α和IFN-γ的水平显著降低（t=5.74、2.37、3.07, P=0.022、0.031、0.033）, 而细胞中Arg1蛋白的表达和培养液上清中TGF-β和IL-10的水平显著增加（t=3.94、2.19、2.44, P=0.025、0.047、0.035）, 细胞中p-JAK3/JAK3和p-STAT5/STAT5的比值显著降低（t=3.41、2.32, P=0.015、0.023）。与Ox-LDL+DMY组比较, Ox-LDL+DMY+AG-490组细胞中iNOS蛋白的表达及培养液上清中TNF-α和IFN-γ的水平显著上调（t=3.14、3.41、3.74, P=0.017、0.028、0.023）, 而Arg1蛋白的表达及TGF-β和IL-10的水平显著下调（t=2.87、2.85、3.47, P=0.025、0.035、0.028）。结论 DMY抑制Ox-LDL诱导的巨噬细胞M1型极化, 其机制可能与激活JAK3/STAT5信号通路有关。