Annexin-A1模拟肽Ac2-26抑制小胶质细胞释放炎性介质的作用研究

摘要

目的观察Annexin-A1模拟肽Ac2-26对小胶质细胞炎性介质肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和一氧化氮（NO）释放的影响及其对Toll样受体2（TLR2）的调控作用。方法根据处理不同将大鼠来源的原代小胶质细胞随机分为Aβ1-42组(给予Aβ1-42刺激组)、Aβ1-42+对照乱序肽组(在给予Aβ1-42刺激的同时加入氨基酸乱序组处理)、Aβ1-42+Ae2-26(在给予Aβ1-42刺激的同时加入Ac2-26处理)及空白对照组。经上述处理24 h后,收集各组小胶质细胞。用CCK-8法检测细胞存活率,采用倒置相差显微镜观察细胞形态,收集各组细胞上清液采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定TNF-α、IL-1β、IL-6和NO的浓度,采用Western blot法测定TLR2的蛋白水平。结果 Aβ1-42和Ac2-26对小胶质细胞存活率没有影响,与空白对照组比较差异无统计学意义。Aβ1-42作用后,小胶质细胞形态发生明显变化,由静息的苎麻状变成激活的阿米巴状巨噬细胞样;Aβ1-42组、Aβ1-42+对照乱序肽组、Aβ1-42+Ac2-26及空白对照组上清TNF-α浓度分别为（125.17±7.13）ng/L、（118.78±7.28）ng/L、（24.02±2.62）ng/L和（20.89±1.82）ng/L,IL-13浓度分别为（117.61±8.73）ng/L、（108.90±6.53）ng/L、（27.06±3.32）ng/L和（24.58±3.45）ng/L,11-6浓度分别为（108.67±5.86）ng/L、（102.67±4.85）ng/L、（25.94±2.83）ng/1和（19.68±2.66）ng/L,Aβ1-42+Ac2-26组上清液TNF-α、IL-1β和IL-6浓度明显低于Aβ1-42组、Aβ1-42+对照乱序肽组（P＜0.05）,与空白对照组比较差异无统计学意义。Aβ1-42+Ac2-26组上清液NO浓度为（20.27±2.53）mmol/L,低于Aβ1-42组（75.68±6.14）mmol/L、Aβ1-42+对照乱序肽组（69.25±4.50）mmol/L,与空白对照组（16.39±2.96）mmol/L比较差异无统计学意义。Western blot结果表明,Aβ1-42+Ac2-26组TLR2水平明显低于Aβ1-42和Aβ1-42+对照乱序肽组,与空白对照组比较差异无统计学意义。结论Ac2-26可有效抑制Aβ1-42激活的小胶质细胞释放炎性介质TNF-α、IL-1β、IL-6和NO,主要通过下调TLR2的水平来实现的。Ac2-26可能作为一种新的治疗阿尔兹海默病的靶向药物。