环状RNA-102231增加结肠癌HT-29细胞对顺铂耐药性的作用及其机制

摘要

目的探讨环状RNA-102231（circRNA-102231）增加结肠癌HT-29细胞对顺铂耐药性的作用及其机制。方法用Western blot和RT-qPCR检测顺铂耐药的HT-29/DDP细胞株circRNA-102231和ABCB1的表达水平;在HT-29细胞中分别过表达或敲降circRNA-102231后加入不同浓度的顺铂, 用CCK-8法检测细胞活力, Western blot检测ABCB1蛋白的表达水平, RT-qPCR检测circRNA-102231和ABCB1的mRNA表达水平;用数据库预测并验证与circRNA-102231相结合的microRNA;激活或抑制ERK的同时过表达miR-145, Western blot和RT-qPCR检测ABCB1的蛋白和mRNA表达水平, 荧光素酶报告基因检测ABCB1启动子活性。结果与HT-29细胞相比, HT-29/DDP细胞中circRNA-102231和ABCB1的表达水平均显著上调（均P＆0.05）;过表达circRNA-102231能显著上调ABCB1的表达水平, 降低细胞对顺铂的敏感性（P＆0.05）;敲降circRNA-102231能下调ABCB1的表达水平, 增加细胞对顺铂的敏感性（P＆0.05）;circRNA-102231可以招募miR-145并能够促进其表达;miR-145能促进ERK磷酸化, 激活或抑制ERK活性能够促进或上调ABCB1的表达水平和启动子活性（P＆0.05）。结论 circRNA-102231可能通过miR-145/ERK通路上调ABCB1的表达并提高HT-29细胞对顺铂的耐药性。