Ad-ING4对乳腺癌的生长抑制作用研究

摘要

目的研究腺病毒（adenovirus,Ad）介导的ING4基因（Ad-ING4）表达对人乳腺癌的生长抑制作用。方法采用Ad-ING4腺病毒感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,RT-PCR、Western blot法检测ING4基因在肿瘤细胞中的转录和表达;四唑盐（MTT）法、Hochest33258染色法和流式细胞仪（FCM）检测ING4基因的表达对乳腺癌细胞的生长抑制、周期变化和凋亡效应;半定量RT-PCR检测凋亡相关基因的转录;酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测人血管生成素1（Ang-1）的分泌水平;在乳腺癌的裸鼠移植瘤动物模型上检测Ad-ING4对移植瘤生长的抑制作用,并检测Bcl-2,Bax,Caspase-3等细胞凋亡相关因子的表达。结果 ING4基因可在MDA-MB-231细胞中成功转录及表达,并对乳腺癌细胞有明显增殖抑制及促凋亡作用,G2/M期阻滞达（24.86±1.24）%;Ad-ING4显著抑制移植瘤生长,瘤重抑制率达49%;免疫组化结果显示Ad-ING4上调Bax和Caspase-3的表达,下调Bcl-2、Survivin和CD34的表达。结论 ING4基因在体内外均可明显抑制MDA-MB-231细胞的生长,诱导其凋亡。