反义人端粒酶逆转录酶基因转染对人胃癌细胞系的影响

摘要

目的探讨反义人端粒酶(hTERT)基因治疗的可行性.方法构建hTERT基因的反义表达载体,经脂质体介导转染人未分化胃癌细胞系HGC-27,通过Southern blot检测外源反义基因的整合;RT-PCR及DNA测序法检测反义基因的转录;RT-PCR半定量方法检测被封闭目的基因mRNA的转录水平;TRAP及PCR ELISA方法检测细胞的端粒酶活性;流式细胞仪检测细胞周期变化.结果外源反义hTERT基因已整合入细胞并获稳定转录,且能显著封闭目的基因转录的mRNA,并显著抑制HGC-27细胞的端粒酶活性,抑制HGC-27细胞的增殖并促进其凋亡.结论端粒酶反义hTERT基因可有效地应用于胃癌的基因治疗.