Ang-2在胃癌中的表达及其反义基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响

摘要

目的:探讨促血管生成素-2(Angiopoietin-2，Ang-2)在胃癌组织中的表达及其与肿瘤病理分期的联系;观察反义Ang-2基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响。
　　方法:用Western Blot法检测Ang-2蛋白在10例胃癌组织及10例正常胃组织中的表达，用免疫组化法检测53例不同病理分期的胃癌组织中Ang-2蛋白的表达;应用脂质体转染法将既往实验合成[1]的pEGFP-N1-anti Ang-2转染体外培养的人胃癌细胞SGC-7901，以空载体(pEGFP-N1)转染组和未转染组作对照，RT-PCR及免疫组化检测转染后Ang-2基因及蛋白的表达， MTT法和流氏细胞术检测反义Ang-2基因转染对细胞生长和细胞调亡的影响;分别用上述三组细胞注射于裸鼠皮下，对比观察肿瘤生成的速度和肿瘤组织中的血管生成数量。
　　结果:Ang-2蛋白在正常胃组织中不表达，在不同病理分期的胃癌组织中均成呈阳性表达(F=166.76，P＜0.0001); RT-PCR及免疫组化显示反义Ang-2基因转染组无Ang-2 mRNA及Ang-2蛋白的表达，MTT法检测显示反义Ang-2基因转染组细胞体外增殖能力明显低于其他两组(F=10.39，P=0.0024)，流氏细胞术检测显示活细胞比率明显低于其它两组(x2=3188.9805，P＜0.0001);转染了反义Ang-2基因的胃癌细胞成瘤速度较其它两组明显减慢(第6天(F=10.18，P=0.0005)、第18天(F=7.8，P=0.0021)及第30天(F=79.58，P＜0.0001)，肿瘤组织中血管生成的数量较其它两组明显减少(第1周(F=15.18，P＜0.0001)、第2周(F=3.50，P=0.0444)、第3周(F=39.02，P＜0.0001))。
　　结论:胃癌组织中Ang-2的表达与胃癌血管生成及胃癌侵袭能力密切相关;反义Ang-2基因转染可封闭人胃癌细胞SGC-7901中Ang-2mRNA及Ang-2蛋白的表达，抑制其体外生长，促进其凋亡;并对其体外成瘤性及其新生血管的生成有明显的抑制作用。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 主要材料

1．2 研究方法

2 结果

2．1 Western Blot结果

2．2 免疫组化结果

2．3 转染细胞株的筛选及反义Ang-2基因转染效果

2．4 MTT法检测结果

2．5 流氏细胞术检测结果

2．6 鼠移植瘤形成情况

2．7 鼠移植瘤微血管密度(MVD)测定结果

3 讨论

参考文献

附图

文献综述 Ang-2对肿瘤生长的作用

致谢

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