长链非编码RNA HNF1A-AS1在胃肠胰神经内分泌肿瘤中的表达及意义

摘要

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肝细胞核因子1 alpha反义链1(hepatocyte nuclear factor 1 alpha-antisense 1,HNF1A-AS1)在胃肠胰神经内分泌肿瘤(gastroenteropancreatic neuroendocrine neoplasms,GEP-NENs)中的表达及意义。方法采用人全转录组芯片技术获得3例胃神经内分泌肿瘤(gastric neuroendocrine neoplasms,G-NENs)及其相应癌旁组织之间的多个差异表达lncRNA,并从中筛选出HNF1A-AS1作为本实验的目标lncRNA分子;采用qRT-PCR验证芯片结果的可靠性;采用质粒转染、MTT法、迁移实验检测HNF1A-AS1对GEP-NENs细胞系LCC-18和BON-1细胞增殖和迁移能力的影响;采用qRT-PCR和Western blotting分析HNF1A-AS1过表达对于GEP-NENs细胞系上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物表达水平的影响。结果人全转录组芯片结果显示,HNF1A-AS1在3例G-NENs组织中的RNA表达水平均明显低于相应癌旁组织(平均差异倍数=2. 07,P <0. 05),且qRT-PCR结果与芯片结果一致,表明芯片结果真实可靠。LCC-18和BON-1细胞转染pc DNA3. 1-HNF1A-AS1后均能显著上调两种细胞内部HNF1A-AS1的RNA表达水平(P均<0. 001)。LCC-18和BON-1细胞过表达HNF1A-AS1后,两种细胞的增殖及迁移能力明显减弱(P均<0. 05)。LCC-18过表达HNF1A-AS1之后细胞内间叶细胞标志物β-catenin mRNA水平和蛋白水平明显下调,而上皮细胞标志物E-cadherin mRNA水平和蛋白水平明显升高(P均<0. 05)。结论 HNF1A-AS1可能通过影响GEP-NENs细胞的增殖、迁移能力和EMT过程参与GEP-NENs的发生、发展,可能是GEP-NENs诊断新指标和潜在的治疗靶点。