miR-19a靶向PTEN调控肝癌细胞增殖、凋亡的实验研究

摘要

目的 研究miR-19a靶向第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)调控肝癌细胞增殖、凋亡的作用.方法 培养肝细胞癌细胞株HepG2、人正常肝细胞株HL-7702,采用qRT-PCR检测miR-19a的表达量,Western blotting检测PTEN的表达量;HepG2细胞分组后转染miR-19a mimic、阴性对照(NC)mimic、表达PTEN的质粒、空白(NC)质粒,采用MTS法检测细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡,双荧光素酶报告基因检测验证miR-19a靶向PTEN基因mRNA 3'UTR.结果 HepG2细胞中miR-19a的表达水平高于HL-7702细胞,PTEN的表达水平低于HL-7702细胞;miR-19a组HepG2细胞的OD490水平高于NC组,凋亡率、PTEN表达量、含有PTEN基因mRNA 3'UTR双荧光素酶报告的荧光活力低于NC组;PTEN质粒+miR-19a组HepG2细胞的OD490水平低于NC质粒+miR-19a组,凋亡率高于NC质粒+miR-19a组.结论 miR-19a对肝癌细胞的增殖具有促进作用,凋亡具有抑制作用,靶向PTEN是介导该作用的分子机制之一.