通过显微介导将鳜总DNA片段导入镜鲤基因组的分子验证

摘要

利用外源基因导入技术,将1nL左右未经遗传修饰的鳜Siniperca chuatsi基因组DNA导入2500余粒镜鲤Cyprinus carpio受精卵核区附近,孵出仔鱼1500余尾,放入池塘300尾正常饲养.利用引物(E-AGG,M-CTA)对显微介导鳜基因镜鲤进行扩增片段长度多态性(AFLP)检测,研究显微介导外源总DNA转化当代的分子生物学结果.结果 表明:在AFLP的15对引物中,显微介导鳜基因镜鲤中有3对引物扩增出了供体鳜基因片段,从DNA水平上验证了在受体鱼的基因组中整合了供体基因片段.将6尾阳性显微介导鳜基因镜鲤与供体鳜相同的AFLP条带进行切下、回收、克隆、测序,发现供体鳜片段序列与阳性显微介导鳜基因镜鲤片段序列完全一致,找到了精确的遗传证据.本研究结果为构建转全鳜基因镜鲤AFLP检测体系,从基因角度研究供体大片段在受体鱼中的导入情况提供了理论依据.