微小RNA-205靶向调控单羧酸转运蛋白1对结直肠癌细胞乳酸水平和增殖能力的影响

摘要

目的探讨微小RNA（miRNA,miR）-205靶向调控单羧酸转运蛋白1（MCT1）对结直肠癌细胞乳酸水平和增殖能力的影响。方法选取2017年6月至2019年6月新乡市中心医院收集的280例结直肠癌和对应癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）分析miR-205和MCT1表达水平;采用慢病毒介导对照miRNA和miR-205感染SW480结直肠癌细胞系,构建miRNA对照组和miR-205组细胞系,采用细胞计数试剂盒（CCK-8）分析两组细胞增殖能力;采用比色法测定肿瘤组织和两组细胞胞内乳酸水平;采用碘化丙锭测定两组细胞周期;采用双荧光素酶报告基因分析miR-205靶基因;采用Western blot分析两组细胞增殖和周期相关蛋白的表达水平。应用SPSS 17.0统计学软件分析,符合正态分布的以均数±标准差表示,组间比较采用t检验。结果癌旁组织miR-205表达水平（1.22±0.19）明显高于结直肠癌组织（0.51±0.11）,差异有统计学意义（t=4.991,P＆0.05）。癌旁组织MCT1蛋白相对表达水平（0.87±0.17）明显低于结直肠癌组织（2.72±0.23）,差异有统计学意义（t=5.198,P＆0.05）。癌旁组织乳酸水平[（1.97±0.24） mmol/L]明显低于结直肠癌组织[（4.71±0.87） mmol/L],差异有统计学意义（t=3.718,P＆0.05）。miRNA对照组细胞乳酸水平[（2.76±0.82） mmol/L]明显高于miR-205组[（1.20±0.18） mmol/L],差异有统计学意义（t=3.338,P＆0.05）。miRNA对照组细胞吸光度值[（1.86±0.64）]明显高于miR-205组[（1.23±0.39）],差异有统计学意义（t=3.011,P＆0.05）。miRNA对照组细胞G0+G1期比例[（32.73±3.09）%]明显低于miR-205组[（43.19±3.12）%],差异有统计学意义（t=2.810,P＆0.05）。miRNA对照组细胞S期比例[（34.22±4.17）%]明显高于miR-205组[（24.44±2.95）%],差异有统计学意义（t=2.422,P＆0.05）。生物信息学分析结果显示MCT1是miR-205的靶基因。miRNA对照组细胞MCT1相对表达水平（1.09±0.12）明显高于miR-205组（0.48±0.10）,差异有统计学意义（t=2.864,P＆0.05）。结论 miR-205通过调控MCT1表达水平,调节细胞内乳酸水平,进而促进了肿瘤细胞增殖。