B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1沉默对前列腺癌PC-3细胞增殖迁移的影响及对同源性磷酸酶和张力蛋白基因/磷酸化蛋白激酶B通路的作用

摘要

目的探讨B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1（Bmi-1）沉默对前列腺癌PC-3细胞增殖迁移的影响及对同源性磷酸酶和张力蛋白基因（PTEN）/磷酸化蛋白激酶B（pAkt）通路的作用。方法将Bmi-1小干扰RNA（siRNA）序列及阴性对照序列转入PC-3细胞,设为Si-Bmi-1组和Si-NC组,稳定转染Bmi-1 siRNA序列的细胞用PTEN抑制剂胰岛素模拟物Bpv干预,设为Si-Bmi-1-Bpv组。采用噻唑蓝（MTT）法和划痕实验检测各组细胞增殖和迁移能力,采用腋窝皮下接种法测细胞成瘤能力,采用蛋白质印迹法（Western blot）检测各组PTEN、pAkt蛋白表达。采用单因素方差分析多样本计量资料,采用t检验分析两两样本的差异。结果 Si-Bmi-1组（0.315±0.030、0.480±0.050、0.659±0.085）和Si-Bmi-1-Bpv组（0.364±0.025、0.702±0.063、0.986±0.091） MTT实验24、48、72 h的吸光度值均低于对照组的（0.401±0.035、0.871±0.071、1.135±0.097）和Si-NC组的（0.398±0.031、0.859±0.067、1.107±0.092,t=24.196,P＆0.01;t=95.326,P＆0.01;t=72.103,P＆0.01）,差异均有统计学意义。Si-Bmi-1组和Si-Bmi-1-Bpv组细胞迁移率分别为（32.37±4.25）%、（55.84±5.27）%,均低于对照组和Si-NC组[（64.08±4.91）%、（63.75±5.12）%,对照组:t=10.919,P＆0.01;t=2.558,P＆0.05,Si-NC组:t=10.545,P＆0.01;t=2.407,P＆0.05],差异均有统计学意义。Si-Bmi-1组和Si-Bmi-1-Bpv组裸鼠腋窝皮下瘤块重量分别为（0.70±0.17）、（1.45±0.18） g,均低于对照组和Si-NC组[（2.35±0.28）、（2.16±0.22） g,对照组:t=15.929,P＆0.01;t=8.550,P＆0.01,Si-NC组:t=16.606,P＆0.01;t=7.899,P＆0.01]。Si-Bmi-1组和Si-Bmi-1-Bpv组PTEN蛋白相对表达量（1.84±0.09、1.06±0.08）高于对照组和Si-NC组（0.16±0.04、0.14±0.04,对照组:t=22.103,P＆0.01;t=17.254,P＆0.01,Si-NC组:t=22.356,P＆0.01;t=6.980,P＆0.01）,pAKT蛋白相对表达量（0.18±0.04、0.35±0.05）]低于对照组和Si-NC组（1.25±0.08、1.20±0.08,对照组:t=20.532,P＆0.01;t=15.380,P＆0.01,Si-NC组:t=17.192,P＆0.01;t=9.025,P＆0.01）;Si-Bmi-1组PTEN蛋白相对表达量高于Si-Bmi-1-Bpv组（t=11.370,P＆0.01）,pAKT蛋白相对表达量低于Si-Bmi-1-Bpv组（t=8.211,P＆0.01）,差异均有统计学意义。结论沉默Bmi-1可抑制前列腺癌PC-3细胞增殖和迁移能力,可能通过上调PTEN,下调pAkt水平发挥调控作用。