长链非编码RNA反义RNA 1靶向微小RNA-501-3p对食管癌细胞恶性生物学行为影响的实验研究

摘要

目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）胸腺生成素反义RNA 1（TMPO-AS1）对食管癌细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法 2016年6月至2019年12月,实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测20例食管癌组织和癌旁组织中lncRNA TMPO-AS1和微小RNA（miR）-501-3p的水平,食管癌Eca109细胞分为lncRNA TMPO-AS1干扰组（转染si-NC和si-TMPO-AS1）;miR-501-3p过表达组（转染miR-NC和miR-501-3p）;lncRNA TMPO-AS1过表达组（转染pcDNA和pcDNA-TMPO-AS1）;lncRNA TMPO-AS1和miR-501-3p共抑制组（转染si-TMPO-AS1+anti-miR-NC和si-TMPO-AS1+anti-miR-501-3p）。噻唑蓝（MTT）法、流式细胞术和Transwell实验分别检测食管癌Eca109细胞增殖、凋亡率、细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法（Western blot）检测相关蛋白水平,双荧光素酶报告系统验证lncRNA TMPO-AS1与miR-501-3p的调控关系。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差进行分析。结果食管癌组织组中的lncRNA TMPO-AS1水平（2.64±0.26）高于癌旁组织（1.00±0.09,t=26.657,P＆0.05）,miR-501-3p水平（0.44±0.04）低于癌旁组织（1.00±0.07,t=31.063,P＆0.05）;干扰lncRNA TMPO-AS1的Eca109细胞24 h增殖（0.36±0.03）低于si-NC组（0.39±0.03,t=2.121,P＆0.05）,48 h增殖（0.45±0.04）低于si-NC组（0.75±0.07,t=11.163,P＆0.05）,72 h增殖（0.57±0.05）低于si-NC组（1.16±0.09,t=17.191,P＆0.05）,迁移细胞数[（54.14±5.65）个]低于si-NC组[（113.02±9.87）个,t=15.531,P＆0.05],侵袭细胞数[（47.69±5.01）个]低于si-NC组[（96.32±9.88）个,t=13.169,P＆0.05],细胞凋亡率[（22.15±2.22）%高于si-NC组[（6.98±0.69）%,t=19.576,P＆0.05];过表达miR-501-3p的Eca109细胞48 h增殖（0.51±0.05）低于miR-NC组（0.77±0.07,t=9.067,P＆0.05）,72 h增殖（0.65±0.06）低于miR-NC组（1.15±0.09,t=13.867,P＆0.05）,迁移细胞数[（61.23±6.33）个]低于miR-NC组[（115.25±9.25）个,t=14.458,P＆0.05],侵袭细胞数[（53.14±5.33）]低于miR-NC组[（98.32±8.47）个,t=13.543,P＆0.05],细胞凋亡[（19.58±1.74）%]高于miR-NC组[（7.23±0.77）%,t=19.471,P＆0.05],差异均有统计学意义。结论 lncRNA TMPO-AS1通过靶向miR-501-3p促进食管癌细胞的恶性生物学行为,可被视为食管癌患者的潜在治疗靶标。