叉头框K1-卷曲螺旋结构域蛋白43轴对大肠癌细胞迁移和上皮-间充质转化的影响

摘要

目的观察叉头框K1（FOXK1）-卷曲螺旋结构域蛋白43（CDC43）轴对大肠癌细胞迁移和上皮-间充质转化（EMT）的影响。方法选取2017年9月到2019年9月南阳医学高等专科学校第一附属医院收治的103例大肠癌和对应的癌旁组织作为研究对象, 采用免疫组织化学分析FOXK1蛋白表达水平;采用规律间隔成簇短回文重复序列及其相关核酸酶9系统（CRISPR-Cas9）技术在SW480细胞中建立FOXK1敲除细胞系（FOXK1 KO组）和对照细胞系（对照组）, 采用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测两组细胞增殖;采用Tanswell分析两组细胞迁移;采用蛋白质印迹法（Western blot）检测两组细胞EMT。组间比较采用t检验。结果与癌旁组织FOCK1表达水平（40.32±6.90）比较, 大肠癌组织FOXK1蛋白表达水平显著增高（159.21±13.85）, 差异有统计学意义（t=4.918, P＆0.05）。与对照组细胞FOXK1蛋白表达水平（1.09±0.21）比较, FOXK1 KO组细胞FOXK1蛋白表达水平显著下降, 差异有统计学意义（t=5.012, P＆0.05）。与对照组细胞吸光度值（1.94±0.28）比较, FOXK1 KO组细胞吸光度值显著下调（1.07±0.19）, 差异有统计学意义（t=3.162, P＆0.05）。Transwell结果显示, 与对照组细胞迁移数量[（95.28±10.20）个]比较, FOXK1 KO组细胞迁移数量显著下降[（48.39±8.21）个], 差异有统计学意义（t=3.091, P＆0.05）。与对照组细胞上皮细胞标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达水平（0.26±0.08）比较, FOXK1 KO组细胞E-cadherin表达水平显著增高（1.05±0.11）, 差异有统计学意义（t=3.001, P＆0.05）。与对照组细胞间质细胞标志物N-钙黏蛋白（N-cadherin）（0.78±0.13）和波形蛋白（Vimentin）（1.15±0.19）表达水平比较, FOXK1 KO组细胞N-cadherin（0.31±0.11）和Vimentin表达水平显著下调（0.39±0.14）, 差异有统计学意义（t=2.891、2.318, P＆0.05）。与对照组细胞CCDC43表达水平（1.20±0.22）比较, FOXK1 KO组细胞CCDC43蛋白表达水平显著下调（0.57±0.18）, 差异有统计学意义（t=2.581, P＆0.05）。结论 FOXK1在大肠癌中高表达, 通过调控CCDC43蛋白水平调节大肠癌细胞增殖、迁移和EMT。