17β-雌二醇对白细胞介素-1β诱导的椎间盘细胞凋亡及基质降解的影响

摘要

目的 观察17β-雌二醇对白细胞介素-1β（IL-1β）诱导的椎间盘细胞凋亡及基质降解的影响。方法 通过Ⅱ型胶原酶消化分离大鼠原代椎间盘细胞,并将椎间盘细胞分为5组,分别为正常组、IL-1β组、IL-1β＋0.1、1.0、10.0 μmol/L的17β-雌二醇组。并检测各组细胞活力、凋亡率、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）活性、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、γ-干扰素（IFN-γ）、IL-6含量、B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关X蛋白（bax）、基质金属蛋白酶（MMP）-3、MMP-13表达,组间比较采用t检验。结果 与正常组（0.48±0.04）比较,IL-1β组（0.35±0.03）中椎间盘细胞活力降低（t＝5.896,P＆0.01）；与IL-1β组比较,0.1,1.0,10.0 μmol/L的17β-雌二醇组细胞活力提高（0.43±0.04比0.35±0.03,t＝6.154,P＆0.01；0.51±0.05比0.35±0.03,t＝6.127,P＆0.01；0.62±0.06比0.35±0.03,t＝5.920,P＆0.01）。与正常组比较,细胞早期凋亡率降低[（12.42±1.19）%比（18.52±1.64）%,t＝6.295,P＆0.01；（7.56±0.76）%比（18.52±1.64）%,t＝6.127,P＆0.01；（3.62±0.40）%比（18.52±1.64）%,t＝6.570,P＆0.01]；晚期凋亡率降低[（11.44±1.18）%比（17.39±1.74）%,t＝6.236,P＆0.01；（8.24±0.82）%比（17.39±1.74）%,t＝5.907,P＆0.01；（5.17±0.52）%比（17.39±1.74）%,t＝6.575,P＆0.01],Caspase-3活性降低（3.85±0.38比4.32±0.43,t＝6.397,P＆0.01；2.91±0.33比4.32±0.43,t＝5.685,P＆0.05；2.02±0.23比4.32±0.43,t＝5.889,P＆0.01）。与正常组比较,TNF-α含量降低[（6.50±0.65） ng/L比（8.74±0.89） ng/L,t＝5.798,P＆0.05；（5.58±0.56） ng/L比（8.74±0.89） ng/L,t＝6.701,P＆0.01；（3.86±0.39） ng/L比（8.74±0.89） ng/L,t＝6.352,P＆0.01],IFN-γ含量降低[（15.28±1.53） ng/L比（17.34±1.73） ng/L,t＝6.136,P＆0.01；（13.12±1.30） ng/L比（17.34±1.73） ng/L,t＝6.520,P＆0.05；（10.67±1.08） ng/L比（17.34±1.73） ng/L,t＝6.735,P＆0.05]及IL-6含量降低[（2.23±0.22） ng/L比（2.78±0.28） ng/L,t＝6.199,P＆0.01；（1.86±0.18） ng/L比（2.78±0.28） ng/L,t＝5.989,P＆0.05；（1.57±0.16） ng/L比（2.78±0.28） ng/L,t＝5.449,P＆0.05]。与正常组比较,bax表达量下调[（0.52±0.05） μmol/L比（0.75±0.07） μmol/L,t＝6.429,P＆0.01；（0.33±0.03） μmol/L比（0.75±0.07） μmol/L,t＝6.380,P＆0.01；（0.31±0.30） μmol/L比（0.75±0.07） μmol/L,t＝6.118,P＆0.01]、MMP-3表达量下调[（0.70±0.07） μmol/L比（1.78±0.18） μmol/L,t＝6.225,P＆0.01；（0.40±0.04） μmol/L比（1.78±0.18） μmol/L,t＝6.485,P＆0.01；（0.38±0.04） μmol/L比（1.78±0.18） μmol/L,t＝6.106,P＆0.05],bcl-2表达量上调[（0.50±0.05） μmol/L比（0.30±0.03） μmol/L,t＝6.120,P＆0.01；（0.95±0.09） μmol/L比（0.30±0.03） μmol/L,t＝6.625,P＆0.01；（1.20±0.12） μmol/L比（0.30±0.03） μmol/L,t＝6.460,P＆0.01]。与正常组比较,1.0、10.0 μmol/L的17β-雌二醇组MMP-3表达量下调[（0.25±0.03） μmol/L比（0.93±0.12） μmol/L,t＝5.259,P＆0.05；（0.32±0.09） μmol/L比（0.99±0.15） μmol/L,t＝5.556,P＆0.05]；1.0、10.0 μmol/L的17β-雌二醇组MMP-13表达量下调[（0.20±0.02） μmol/L比（0.88±0.09） μmol/L,t＝6.479,P＆0.01；（0.20±0.02） μmol/L比（0.88±0.09） μmol/L,t＝6.732,P＆0.01]。结论 17β-雌二醇能抑制IL-1β诱导的椎间盘细胞凋亡及细胞外基质降解。