叉头蛋白转录因子3a/p27激酶抑制蛋白1及氧化应激介导紫铆因抗肺腺癌的机制

摘要

目的观察紫铆因（Butein）的抗肺腺癌作用及叉头蛋白转录因子3a（FOXO3a）/p27激酶抑制蛋白1（p27kip1）和氧化应激在该过程中的作用。方法常规培养A549细胞,分别给予25、50、100μmol/L的Butein处理24 h后,检测细胞活力、细胞迁移能力、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3活性、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶活性、活性氧（ROS）含量、总谷胱甘肽（GSH）水平,从而明确Butein通过激活氧化应激抑制A549细胞。Western blot法检测FOXO3a、p27kip1、B淋巴细胞瘤-2（bcl-2）、bcl-2相关X蛋白（bax）的表达水平。进而采用小干扰RNA（siRNA）干扰法敲减FOXO3a表达并检测FOXO3a、p27kip1以及bax、bcl-2的表达水平;从而明确FOXO3a/p27kip1通路在该过程中的作用。结果 25、50、100μmol/L的Butein处理A549细胞24 h后,细胞活力分别下降到（78. 3±4.6）%、（63.5±4 8）%和（40.1±4 1）%（t=10. 330=0. 000）,细胞划痕间距增大到（120.0±8.4）%、（150.0±10. 6）%和（175. 0±11.1）%（t=4.777,P=0. 001）。Butein处理后Caspase-3、NADPH氧化酶的活性增强,ROS含量增多,总GSH减少。Western blot结果显示Butein激活了FOXO3a/p27kip1通路,上调了bax/bcl-2的比值。siRNA处理后阻断了FOXO3a/p27kip1通路,逆转了Butein引起的bax的增多和bcl-2的减少。结论 Butein能显著抑制肺腺癌A549细胞增殖和迁移,该作用可能是通过激活FOX03a/p27kip1信号通路和细胞内氧化应激进而诱导细胞凋亡实现的。