单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷自杀基因系统对胆囊癌细胞的体外作用

摘要

目的探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-tk/GCV)自杀基因系统对体外胆囊癌细胞的杀伤效果.方法将含有tk自杀基因的重组逆转录病毒载体PLtkSN经脂质体介导转染胆囊癌细胞,并测定不同浓度的GCV对转基因细胞GBC-SD/tk的生长抑制率;将GBC-SD/tk与未转基因细胞GBC-SD按不同的比例混合,噻唑蓝(MTT)法测定GCV对不同混合比例细胞的杀伤率,观察旁观者效应.结果GCV对体外GBC-SD/tk细胞有明显的杀伤作用,与对照组比较差异有非常显著性(P＜0.01),并呈现剂量依赖性的特点.当GCV浓度为1、10、50、100、500mg/L时,杀伤率依次为6.8%、25.2%、54.5%、66.3%、89.3%;在混合细胞中,当GBC-SD/tk细胞所占比例分别是0、10%、20%、50%、70%、100%时,GCV对混合细胞的杀伤率依次为0、19.7%、40.3%、77.7%、88.0%、93.5%,提示存在旁观者效应.结论HSV-tk/GCV自杀基因系统有望成为治疗胆囊癌的有效手段之一.