Smad4小分子干扰RNA对转化生长因子-β诱导的纤溶酶原激活物抑制剂-1表达的影响

摘要

目的探讨Smad4小分子干扰RNA（siRNA）对转化生长因子（TGF）-β诱导纤溶酶原激活物抑制剂（PAI）-1的表达的影响及作用机制。方法将Smad4 siRNA转染入肝星状细胞24h后行TGF-β（1μg/L）刺激,24、48 h后收集细胞。利用萤光素酶报告基因法测定Smad结合转写因子的活性;Northern印迹分析技术检测PAI-1 mRNA表达的变化;Western印迹分析观察Smad4蛋白、PAI-1蛋白的变化。结果Smad4 siRNA能抑制Smad4蛋白（3.0±0.1比16.0±0.5）表达;Smad4 siRNA抑制TGF-β1和ALK5激活的4×SBE荧光素酶报告基因活性;TGF-β时间依赖性促进PAI-1 mRNA表达,24 h达高峰;Smad4 siRNA从mRNA（1.3±0.1比6.5±0.2）和蛋白（1.50±0.15比5.52±0.36）水平抑制TGF-β激活的PAI-1的表达。结论Smad4 siRNA能够有效地阻断TGF-β诱导的PAI-1表达。