小激活RNA介导的大鼠肝细胞株BRL中诱导型一氧化氮合酶上调表达的研究

摘要

目的应用RNA激活技术激活大鼠肝细胞株BRL中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因的表达,筛选出有效的激活序列,进一步证明了该现象普遍存在于哺乳动物细胞中。方法设计并合成了4条靶向大鼠iNOS基因启动子DNA序列互补的双链RNA分子（saRNA-1、saRNA-2、saR-NA-3及saRNA-co）,脂质体法转染BRL细胞。转染后收集转染后细胞,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测iNOS的表达。结果大鼠肝细胞株BRL转染羟基荧光素（FAM）标记的saRNA后,70%以上细胞内有绿色荧光表达。转染72 h半定量RT-PCR检测显示saRNA-2转染后能够激活BRL细胞iNOS基因的表达,其他saRNA转染后未见激活现象。结论利用RNA激活技术可成功激活大鼠肝细胞BRL细胞株iNOS基因的表达。