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Rac1基因沉默对髓母细胞瘤细胞侵袭移动的影响

         

摘要

目的观察Rac1基因沉默后对髓母细胞瘤细胞侵袭移动的影响。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测Rac1 mRNA和蛋白在髓母细胞瘤Daoy细胞株中的表达;通过转染Rac1shRNA观察Rac1基因沉默后Daoy细胞骨架的变化,再转染Rac1N17和Rac1L61,观察Rac1基因缺失和表达增强后对Daoy细胞侵袭、移动的影响。结果 Rac1 mRNA和蛋白在Daoy细胞株中均有高表达;Rac1基因沉默后Daoy细胞交联的F-actin网和细胞膜伪足形成减少;单层细胞划痕24 h后,Rac1shRNA组、Rac1N17组、对照质粒(contro1)组细胞迁移数分别是86±4、97±6、198±7;Rac1shRNA和Rac1N17两组分别与control组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。在侵袭实验中,Rac1shRNA组、Rac1N17组、对照质粒组细胞侵袭数分别是30±4、45±6、78±7;Rac1shRNA组和Rac1N17两组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Rac1基因与Daoy细胞骨架形成密切相关,RNA干扰沉默Rac1基因可以抑制Daoy细胞的侵袭移动。

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