粒细胞集落刺激因子和干细胞因子对骨髓单个核细胞的动员效率及其机制

摘要

目的联合应用粒细胞集落刺激因子（G-CSF）和干细胞因子（SCF）动员骨髓单个核细胞,评价其动员效果,探讨CXCL12/CXCR4信号通路在骨髓单个核细胞动员中的作用及机制。方法将昆明小鼠随机分为两组,治疗组皮下注射重组鼠G-CSF100μg/（kg·d）和重组鼠SCF25μg/（kg·d）,连续使用5 d;对照组皮下注射等剂量的生理盐水。每组于不同时间点取小鼠骨髓,分离培养骨髓单个核细胞,计数成纤维样细胞集落形成单位（CFU-F）的个数;应用流式细胞仪分选CD34+CXCR4+单个核细胞（MNCs）;应用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定骨髓细胞外液CXCL12a的水平;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测骨髓CXCL12 mRNA表达变化。结果应用G-CSF/SCF后,骨髓及外周血中单个核细胞计数较对照组明显增加（P＜0.01）,CFU-F形成能力显著增强（P＜0.05）;流式分选表明CD34+CXCR4+细胞占骨髓CD34+单个核细胞总数的（44.6±8.7）%;RT-PCR和ELISA检测示骨髓CXCL12 mRNA表达下降,骨髓细胞外液CXCL12蛋白也显著下降,两者变化一致。结论 G-CSF/SCF可有效地诱导骨髓单个核细胞动员,其机制可能是通过破坏骨髓CXCL12/CXCR4信号通路平衡,下调CXCL12/CXCR4间相互作用,以促进骨髓单个核细胞动员。