流体剪切力对体外培养人关节软骨细胞代谢的影响

摘要

目的检测体外培养人关节软骨细胞在间断剪切力作用下细胞增殖、Ⅱ型胶原mRNA表达和聚集蛋白聚糖mRNA表达的变化,观察流体剪切力对人关节软骨细胞代谢的影响。方法将传代的第2代软骨细胞分为载荷组和对照组,载荷组按40 r/min每天置于摇床上处理2 h,每天2次;对照组置于培养箱中静止培养。通过噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖,免疫组织化学法检测软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测Ⅱ型胶原mRNA表达和聚集蛋白聚糖mRNA表达。结果 MTT法测得载荷组吸光度值为0.58±0.05,对照组为0.42±0.06,载荷组吸光度值高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。Ⅱ型胶原免疫组织化学检测所得平均吸光度（A）值为:对照组0.184 60±0.036 32,载荷组0.306 10±0.053 00,载荷组Ⅱ型胶原平均吸光度高于控制组,差异有统计学意义（P＜0.05）。RT-PCR法检测结果显示对照组和载荷组Ⅱ型胶原mRNA吸光度比值分别为0.080±0.006和0.150±0.005,聚集蛋白聚糖mRNA吸光度比值分别为0.100±0.004和0.230±0.004,载荷组均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论一定强度流体剪切力能够促进人关节软骨细胞的增殖及代谢,使其合成Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖增多。