慢病毒介导靶向雌激素受体基因的小干扰RNA对肝癌细胞生长及侵袭的影响

摘要

目的利用小干扰RNA（siRNA）抑制肝癌细胞雌激素受体（ER）基因的表达,观察其受抑制对细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法通过构建ER-siRNA慢病毒载体系统转染人肝癌细胞Hep3B细胞,将实验分为3组:空白对照组、阴性对照组及siRNA组,应用Western blot检测ER基因沉默的效果,用噻唑蓝（MTT）方法检测细胞增殖,用流式细胞仪观察肿瘤细胞凋亡,用Transwell侵袭实验检测检测Hep3B细胞体外侵袭力的改变。结果成功构建ER基因的慢病毒siRNA载体,感染肝癌细胞明显抑制ER蛋白表达,抑制率56.64%;空白对照组、阴性对照组及小干扰RNA组MTT的吸光度（A）值分别0.68±0.11、0.60±0.13和0.49±0.10（P＜0.05）;流式细胞检测S期的细胞比例分别为（35.23±4.68）%、（30.95±3.17）%和（21.88±2.13）%（P＜0.05）;迁移实验细胞数分别为（97.66±5.03）、（90.67±3.79）和（37.00±10.14）个（P＜0.05）。结论重组ER-siRNA慢病毒可抑制Hep3B细胞ER蛋白表达水平,抑制细胞增殖,促进细胞调亡,降低肿瘤细胞侵袭能力。