雷公藤甲素诱导肝癌细胞株HepG2凋亡与胞内钙离子浓度的关系

摘要

目的观察不同浓度雷公藤甲素作用于人肝癌细胞株HepG2细胞,检测其体外生长增殖抑制率、细胞凋亡率及细胞内Ca2+浓度的变化,探讨其诱导肝癌细胞凋亡的机制。方法应用不同浓度的雷公藤甲素（12.5、25、50、100μg/L）处理HepG2细胞,用噻唑蓝（MTT）比色法测定不同作用时间细胞增长抑制率;流式细胞仪（FCM）膜联蛋白V/碘化丙锭（Annexin V/PI）双染色法检测细胞凋亡率的变化;采用荧光探针技术（Fluo-3）和激光共聚焦显微镜,测定细胞内Ca2+浓度的变化。结果 （1）雷公藤甲素（12.5、25.0、50.0、100.0μg/L）对人肝癌细胞HepG2增殖有抑制作用（P＜0.05）,抑制率与药物浓度、作用时间呈正相关;（2）雷公藤甲素（12.5、25.0、50.0、100.0μg/L）能够诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡,随药物作用时间的延长、药物浓度的增高,细胞凋亡率逐渐增高;（3）作用时间为24、48 h时,细胞内Ca2+荧光强度与药物浓度、作用时间呈正相关,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）,而作用时间至72 h时,荧光强度逐渐减弱甚至恢复至正常水平（P＞0.05）。结论雷公藤甲素能够抑制人肝癌细胞HepG2的生长增殖,其效应呈时间、剂量依赖性;且能诱导HepG2凋亡,其诱导凋亡分子机制可能与细胞内Ca2+浓度变化有关。