体外诱导骨髓间充质干细胞成骨表型的变化

摘要

目的探讨诱导人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）分化为成骨细胞过程中表型变化。方法抽取骨髓分离单个核细胞,用DMEM条件培养基诱导hBMSCs向成骨细胞分化;相差显微镜观察成骨细胞形态,噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖,分别应用对硝基苯磷酸盐法和BM-Purple法测定成骨细胞碱性磷酸酶（ALP）分泌量和含量,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞ALP mRNA的表达。结果在诱导第5、10、15、20 d,改良Gomori染色细胞阳性率分别为（10.35±3.79）%、（11.48±5.92）%、（35.28±7.05）%和（46.7±6.18）%,诱导至12 d,p1、p3、p5、p7、p9成骨细胞ALP活性测定结果分别为:60.90±2.95、61.36±1.95、37.42±4.06、20.67±1.98、7.63±1.08。培养代次小于（等于）p5的细胞可见ALP mRNA表达,而p7、p9细胞未见表达。结论 hBMSCs经定向诱导后可以分化为成骨细胞,随着诱导细胞传代次数的增加成骨表型降低。