上调人X连锁甲基化CpG结合蛋白2抑制6-羟基多巴胺诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究

摘要

目的观察SH-SY5Y细胞凋亡,酪氨酸羟化酶（TH）、甲基化CpG结合蛋白2（MeCP2）蛋白表达变化,探讨MeCP2在帕金森病中的作用机制。方法利用真核表达载体构建、细胞转染等技术获得MeCP2表达上调的SH-SY5Y细胞株。免疫荧光技术和Western blot检测转染重组质粒对SH-SY5Y细胞内源性MeCP2蛋白表达的影响以及TH表达的变化;用细胞计数试剂盒（CCK-8）法、流式细胞仪检测正常SH-SY5Y细胞、上调MeCP2表达的SH-SY5Y细胞在6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导下细胞活性及细胞凋亡的变化。结果利用pEGFP-N1-MeCP2靶向MeCP2的上调质粒转染SH-SY5Y细胞来上调MeCP2在SH-SY5Y细胞中的表达,在6-0HDA诱导下,免疫荧光检测MeCP2、TH的表达未下降,Western blot进一步证实MeCP2、TH的表达未下降,MeCP2/3-actin、TH相对表达量分别为0.886 5±0.048 6、0.463 9±0.026 6,流式细胞仪检测显示SH-SY5Y细胞细胞凋亡率约为（0.40±0.00）%,CCK-8检测细胞存活率约为（96.25±5.28）%。结论 MeCP2帕金森病的发病过程中起重要作用。转染pEGFP-N1-MeCP2重组质粒可抑制6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,提高TH的表达,提高细胞存活率。