小干扰RNA沉默垂体瘤转化基因抑制人泌乳素型垂体瘤细胞的生长

摘要

目的观察小干扰RNA（siRNA）沉默垂体瘤转化基因（PTTG）对原代培养的人泌乳素型垂体瘤细胞（HPAs）生长的影响。方法原代培养人泌乳素型垂体腺瘤细胞,稳定传代后分为3组:空白对照组、阴性对照组、siRNA-PTTG转染组,转染48 h后细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测各组细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法测定PTTG mRNA、蛋白的表达;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）试剂盒检测Caspase-3的活性;放射免疫法测定各组细胞上清中泌乳素的水平。结果与空白对照组及阴性对照组比较,siRNA-PTTG转染组HPAs细胞PTTG mRNA和蛋白表达明显下调,细胞增殖受到抑制[阴性对照组、转染组抑制率分别为（3.02±1.77）%、（25.38±0.11）%,P＜0.05],凋亡明显增多[3组凋亡率分别为:（6.21±2.36）%、（7.23±3.56）%、（32.33±5.69）%,P＜0.05],Caspase-3活性增加（P＜0.05）;放射免疫法显示siRNA-PTTG转染组上清中泌乳素分泌水平下降,为空白对照组的32.9%（P＜0.05）。结论下调PTTG基因可抑制人泌乳素型垂体瘤细胞生长,促进其凋亡,从而降低泌乳素分泌水平。