上调微小RNA-3178表达对肝癌血管内皮细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

摘要

目的 通过合成及转染微小RNA (miRNA)-3178模拟物(mimic),观察上调miR-3178表达对肝癌血管内皮细胞(HCC TECs)增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)验证肝窦内皮细胞(HSECs)和肝癌血管内皮细胞中miR-3178的差异表达.miR-3178 mimic转染肝癌血管内皮细胞上调miR-3178表达,实验分为3组:空白对照组(CON组)、miR-3178上调组(Mimic组)、阴性对照组(NC组),Real-time PCR验证转染前后肝癌血管内皮细胞miR-3178表达.荧光显微镜下观察转染效率.流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖.结果 Real-time PCR结果显示HCC TECs中miR-3178表达明显低于HSECs(P ＜0.01).转染后HCC TECs中miR-3178表达明显高于转染前(P＜0.01),细胞转染效率达到90％以上.MTT结果显示Mimic组在转染后24、36、48、72 h增殖率均明显低于其他组(P＜0.05),在72 h增殖率达到最低.细胞凋亡结果显示,Mimic组[(18.19±2.25)％]凋亡率明显高于CON组[(6.43±1.23)％]和NC组[(6.41±1.56)％],差异有统计学意义(P＜0.01).细胞周期结果显示,Mimic组[(69.12±4.87)％]G0/G1期细胞明显多于CON组[(55.12±4.13)％]和NC组[(54.08±4.72)％],差异有统计学意义(P＜0.05).Mimic组[(10.98士1.76)％]S期细胞明显少于CON组[(24.23±2.13)％]和NC组[(24.78±2.24)％],差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HCC TECs中miR-3178明显低表达,上调miR-3178表达能明显抑制HCC TECs细胞增殖,促进细胞凋亡及G0/G1期细胞阻滞.