富含半乳糖凝集素-1基因修饰的骨髓间充质干细胞与脱细胞真皮基质补片共培养的研究

摘要

目的探讨半乳糖凝集素-1（Galectin-1）基因修饰的骨髓间充质干细胞（BMSCs）与脱细胞真皮基质（ADM）补片共培养的可行性。方法将Ad-绿色荧光蛋白（GFP）-Galectin-1转染间充质干细胞（MSCs）后,荧光显微镜下观察荧光表达,通过实时定量反转录聚合酶联反应（RT-qPCR）法检测Galectin-1基因表达,酶联免疫吸附试验（FLISA）法检测Galectin-1蛋白表达,Western blot检测肌间线蛋白（Desmin）表达,共聚焦荧光显微镜下观察Ad-GFP-Galectin-1转染BMSCs与ADM补片共生长情况。结果 Ad-GFP-Galectin-1转染BMSCs后,荧光显微镜下可见绿色荧光,72 h达高峰;RT-qPCR检测Galectin-1 mRNA的表达,Galectin-1 mRNA在空白对照组（PBS组）中相对表达水平为1.00;在Ad-GFP-Galectin-1（Ad-GFP-Galectin-1组）和Ad-GFP（Ad-GFP组）转染BMSCs中相对表达水平分别为4.11和1.09;ELISA证实BMSCs表达Galectin-1、Galectin-1表达量在Ad-GFP-Galectin-1组、Ad-GFP组和PBS组中分别为48 h:（197.28±8.78）、（25.52±1.56）、（24.53±2.96）μg/L;72 h:（264.33±5.43）、（25.40±2.06）、（25.46±1.13）μg/L;96 h:（172.41±3.61）、（25.22±1.61）、（28.01±1.26）μg/L;120 h:（155.53±7.25）、（24.84±2.35）、（26.65±1.54）μg/L。Western blot证实大鼠Desmin表达升高;共聚焦荧光显微镜下观察Ad-GFP-Galectin-1转染的BMSCs与ADM融合生长良好。结论 Galectin-1能诱导BMSCs合成Desmin;Ad-GFP-Galectin-1转染的BMSCs与脱细胞真皮基质（ADM）补片融合生长良好。