泛素样含PHD和环指域1沉默对人肿瘤细胞株HO-8910和HO-8910 PM生物学功能的影响

摘要

目的观察泛素样含PHD和环指域1（UHRF1）沉默对人肿瘤细胞HO-8910和HO-8910 PM的影响。方法以人卵巢癌细胞株HO-8910和HO-8910 PM为研究对象,采用RNA干扰（RNAi）技术下调UHRF1在上述细胞中的表达;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HO-8910和HO-8910 PM细胞转染前后UHRF1 mRNA的表达水平;Western blot检测UHRF1蛋白的表达水平;转染第4天,用流式细胞术检测两株细胞转染前后的凋亡水平;转染后24、48、72、96、120 h,用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测UHRF1敲减前后两株细胞增殖水平的变化。结果 RNAi技术敲减UHRF1在HO-8910和HO-8910 PM细胞中的表达后,实验组（kd组）中UHRFI mRNA和蛋白的表达均低于阴性对照组（nc组）和空白组（bl组,P＜0.01）;流式细胞术结果显示,HO-8910细胞在kd、nc和bl组的凋亡率分别为（16.04±1.41）%、（8.43±0.94）%、（7.76±0.36）%,kd组细胞凋亡率高于nc组和bl组（P＜0.01）,nc组和b1组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;HO-8910 PM细胞在kd、nc、bl组的凋亡率分别为（17.98±4.39）%、（8.92±2.39）%、（8.18±0.83）%,kd组细胞凋亡率高于nc组和bl组（P＜0.05）,nc组和bl组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;CCK-8结果显示,HO-8910和HO-8910 PM细胞从转染后48 h开始,kd组细胞增殖率低于nc组和bl组,差异有统计学意义（P＜0.01）,而nc组和bl组细胞比较,细胞增殖率差异无统计学意义（P＞0.05）。结论抑制UHRF1在人卵巢癌细胞株HO-8910和HO-8910 PM的表达后,细胞的凋亡水平增高,增殖能力减弱。