盐酸戊乙奎醚通过调控酪氨酸蛋白激酶2/信号转导子和转录激活子3通路发挥抗心肌缺血再灌注损伤作用

摘要

目的 观察盐酸戊乙奎醚(HPC)对缺血再灌注心肌的保护作用,探讨HPC通过调控酪氨酸蛋白激酶2/信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)通路发挥抗心肌缺血再灌注损伤(IRI)作用.方法 36只健康雄性大鼠随机分为6组:(1)假手术组(Sham);(2)缺血再灌注组(IRI);(3)盐酸戊乙奎醚处理组(PHC);(4)盐酸戊乙奎醚处理+ AG-490组(PHC+AG);(5)AG-490组(AG);(6)二甲基亚砜组(DMSO).Sham组:左冠状动脉前降支(LAD)穿线并不阻断冠状动脉;IRI组:结扎LAD 30 min、再灌注120 min;PHC组和PHC+ AG组在缺血处理前30 min,经腹腔注射PHC(2 mg/kg),其余同IRI组;PHC+ AG组、AG组和DMSO组在再灌前10 min分别静脉注射JAK2抑制剂AG-490(3 mg/kg)及1％DMSO溶液(0.4mL/kg),其余同IRI组.用监护仪连续监测并记录缺血前纪录基础值、再灌后30、60、90 min记录心率(HR)、平均动脉压(MAP)和心率与收缩压的乘积(RPP).各组大鼠于再灌注开始90 min后处死,取出左心室心肌组织,提取总蛋白,用Western blot法分析心肌JAK2、STAT3和磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白表达变化.结果 IRI组、PHC组、PHC+ AG组、AG组和DMSO组各组与组内缺血前基础值HR[(343±20)次/分]、MAP[(109±11) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)]和RPP (44 ±3)比较,再灌后HR[(280 ±12)次/分]、MAP[(84±15) mmHg]和RPP(29±5)降低(P＜0.05);与灌注后IRI组比较,PHC组HR[(320±15)次/分]、MAP[(90±11) mmHg]和RPP(34±6)增高(P＜0.05);与灌注后PHC组比较,PHC+ AG组HR[(301±14)次/分]、MAP[(83±11) mmHg]和RPP(29 ±4)降低(P＜0.05).心肌p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3的蛋白灰度分析显示:与IRI组(0.50±0.08、0.30 ±0.09)比较,PHC组蛋白表达(0.91 ±0.02、0.65±0.05)增高(P＜0.01);与PHC组比较,PHC+ AG组蛋白表达(0.28 ±0.04、0.25±0.08)降低(P＜0.01).结论 PHC预处理可激活JAK/STAT信号转导通路发挥心肌保护作用.应用JAK/STAT信号转导通路抑制剂AG-490可使PHC缺血预处理丧失心肌保护作用.